玫瑰屬薔薇科薔薇屬植物，不但具有一定的園林觀賞價(jià)值，而且有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和藥用價(jià)值。玫瑰常規(guī)以分株、壓條、扦插等方法繁殖，繁殖率較低。現(xiàn)甘肅省慶陽(yáng)縣有一玫瑰生產(chǎn)基地開展研究建立玫瑰的快速繁殖體系，并為玫瑰的工廠化生產(chǎn)和規(guī)模化種植提供科學(xué)依據(jù)。
一、材料與研究方法
1.材料：以甘肅省隴東學(xué)院校園內(nèi)栽培的玫瑰為材料。
2.研究方法：以MS或1/2MS為基本培養(yǎng)基，附加不同濃度的6-BA、IAA、IBA、NAA等，蔗糖3％(為了降低成本，蔗糖均用市售白砂糖代替)，瓊脂0.35％，pH5.8，培養(yǎng)溫度為25℃，光照時(shí)間每天12小時(shí)，光照強(qiáng)度約1500 lx。將啟動(dòng)培養(yǎng)基上腋芽長(zhǎng)出的無(wú)根苗剪成單芽莖段，轉(zhuǎn)入不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)不定芽產(chǎn)生；不定芽繼代周期為5周，增殖培養(yǎng)時(shí)將不定芽塊切割成小芽塊轉(zhuǎn)至增殖培養(yǎng)基中，每100毫升培養(yǎng)瓶中接種3個(gè)芽塊；生根前將較弱的無(wú)效苗轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中促使苗健壯；生根培養(yǎng)時(shí)將高約3厘米左右的芽剪下插入生根培養(yǎng)基，生根苗移栽采用“二步法”。
二、結(jié)果與分析
1.無(wú)性系的建立。2005年6月從該院校園栽培的植株上取生長(zhǎng)健壯的半木質(zhì)化枝條，依常規(guī)方法滅菌處理后，剪成莖尖和帶腋芽莖段，接種于無(wú)性系建立培養(yǎng)基上。20天后統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，就無(wú)性系建立而言，基本培養(yǎng)基MS比1/2MS效果好，在基本培養(yǎng)基中附加每升0.5毫克的6－BA和每升0.05毫克NAA，有利于愈傷組織的誘導(dǎo)和芽的萌生，愈傷組織誘導(dǎo)率可達(dá)76.5％，萌芽率為52.9％，且芽生長(zhǎng)健壯。
2.不定芽的誘導(dǎo)。將無(wú)性系幼莖切成單芽莖段，分別接種在不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，結(jié)果表明，以MS為基本培養(yǎng)基，附加每升1～3毫克的6－BA和每升0.1～0.5毫克的NAA，均可高頻誘導(dǎo)產(chǎn)生不定芽，當(dāng)6－BA以較高濃度(每升2～3毫克)與NAA配合使用時(shí)，芽誘導(dǎo)率均為100％，產(chǎn)生的不定芽數(shù)量多，但莖不伸長(zhǎng)，均為葉片，長(zhǎng)勢(shì)弱；較低濃度6－BA(每升1毫克)與每升0.1毫克NAA配合使用，雖然不定芽誘導(dǎo)率下降，但芽長(zhǎng)勢(shì)良好。說(shuō)明MS附加較低濃度的6－BA與NAA利于玫瑰不定芽誘導(dǎo)與生長(zhǎng)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，誘導(dǎo)產(chǎn)生的包埋于培養(yǎng)基中的不定芽長(zhǎng)勢(shì)最好，可能與其充分吸收營(yíng)養(yǎng)有關(guān)。
3.芽的繼代增殖培養(yǎng)及有效苗的產(chǎn)生。將產(chǎn)生的不定芽塊切割成小芽叢進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)，增殖培養(yǎng)基為 MS+6-BA每升0.3毫克+NAA每升0.05毫克，繼代周期為5周。在此培養(yǎng)基上，玫瑰仍以不定芽方式增殖，且大部分不定芽明顯增高，葉片展開，長(zhǎng)勢(shì)較好。每100毫升培養(yǎng)瓶接種3個(gè)芽塊(約35個(gè)芽)，經(jīng)過(guò)一個(gè)繼代周期培養(yǎng)，芽總數(shù)達(dá)132個(gè)，增殖系數(shù)為3.77。其中，高度在3厘米左右，能用于生根的有效苗的比率為43％，將較矮、長(zhǎng)勢(shì)弱的無(wú)效苗剪下，轉(zhuǎn)到1/2 MS壯苗培養(yǎng)基上，培養(yǎng)20天左右，芽苗明顯長(zhǎng)高、健壯，葉片舒展，葉色濃綠，可用于生根。
4.激素濃度對(duì)生根的影響。將增殖培養(yǎng)基上高度在3厘米左右的芽剪下，與壯苗后的芽一起插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根。結(jié)果顯示，玫瑰為難生根植物，不同培養(yǎng)基和激素濃度對(duì)玫瑰生根的影響差異較大。培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)離子強(qiáng)度對(duì)玫瑰生根有明顯影響，無(wú)機(jī)離子減半(1/2MS)有利于生根。單獨(dú)附加每升0.2～0.5毫克的IAA、IBA或NAA對(duì)根的產(chǎn)生及根的生長(zhǎng)均有促進(jìn)作用。每升0.2～0.5毫克的IAA與每升0.2～0.5毫克IBA配合使用，生根率明顯提高，平均為38.6％，且切口端愈傷化程度低，產(chǎn)生的根短而粗壯，利于移栽；IAA、IBA、 NAA三者配合使用，生根效果最佳，生根率最高達(dá)76.3％，產(chǎn)生的根粗壯、數(shù)量多，便于移栽成活。篩選出最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+每升IAA0.5毫克+每升IBA0.5毫克+每升 NAA0.2毫克。
5.煉苗與移栽。將生根的組培苗在室內(nèi)打開瓶蓋煉苗2～3天后，在自來(lái)水中洗凈根部培養(yǎng)基，移入珍珠巖苗床，外搭塑料拱棚及遮陽(yáng)網(wǎng)，控制光照度在5000～10000 lx以內(nèi)，溫度在15℃～35℃，濕度在85％以上，每周噴1次10％的MS大量元素營(yíng)養(yǎng)液，2周后逐漸打開小拱棚，增加光照，4周后，便可進(jìn)行常規(guī)管理。此法移栽，成活率可達(dá)94.3％。
三、小結(jié)
試驗(yàn)結(jié)果表明，適合玫瑰不定芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為 MS+6-BA每升1.0毫克+NAA每升0.1毫克；適合芽增殖的培養(yǎng)基為MS+6-BA每升0.3毫克+NAA每升0.05毫克，在此培養(yǎng)基上芽的增殖系數(shù)為3.77，可直接用于生根的有效苗的比率為43％；適合芽生根的培養(yǎng)基為1／2MS+IAA每升0.5毫克+IBA每升0.5毫克+NAA每升0.2毫克，在此培養(yǎng)基上芽的生根率為76.3％。生根苗煉苗后以珍珠巖作基質(zhì)，移栽成活率為94.3％。據(jù)計(jì)算，當(dāng)增殖系數(shù)為3.77、生根率為76.3％、移栽成活率為94.3％時(shí)，1個(gè)芽經(jīng)1年10代培養(yǎng)，可產(chǎn)生約58萬(wàn)個(gè)芽，考慮到生產(chǎn)設(shè)施及人力等因素的限制，如此多的芽不可能一次全部生根，導(dǎo)致無(wú)法處理，甚至倒苗。因此，在實(shí)際生產(chǎn)中，如果從第7代開始將高度在3厘米左右43％芽進(jìn)行生根與移栽，則1年可由1個(gè)芽生產(chǎn)3349株商品苗；同樣，如果從第8代開始，1年1個(gè)芽可生產(chǎn)12，000余株商品苗。這樣，對(duì)降低成本、提高效益是十分必要的。 |
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